Nachweis von CWP-1 (Zellwandprotein 1)
Giardien sind einzellige Parasiten, die im Dünndarm ihres Wirtes leben. Sie verbreiten sich, indem sie Zysten produzieren, die dann mit dem Kot ausgeschieden werden. Diese Zysten können in feuchter Umgebung monatelang überleben. Nimmt nun beispielsweise ein Hund diese Zysten auf, entwickeln sie sich in seinem Dünndarm zu fortpflanzungsfähigen Stadien (Trophozoiten), die dann neue Zysten bilden.
Zum Nachweis stehen zum einen verschiedene Antigen-ELISAs zur Verfügung und zum anderen der Zysten-Direktnachweis im Kot.
Der neu in unserem Labor etablierte Antigen-ELISA weist nun das spezielle Protein CWP-1 (Zellwandprotein 1) nach, das bei der Zystenbildung entsteht. Dieses Protein ist ein Bestandteil des Heterodimers „Giardia Spezifisches Antigen GSA-65“.
Laut Literatur ist dieser immunologische Nachweis von Giardia-spezifischen Zystenwandproteinen für die Diagnostik einer akuten Giardia-Infektion etabliert und ist somit sowohl als Screening-Verfahren als auch als Therapiekontrolle geeignet. Der von uns verwendete Giardia-Antigen-ELISA hat eine Sensitivität von 93.8% und eine Spezifität von 100%.
Hintergrund:
Im Entwicklungszyklus der Giardien wird durch bestimmte Faktoren im Darm (pH-Wert, Gehalt an Gallensalzen) die Differenzierung der beweglichen Stadien (Trophozoiten) zu Zysten ausgelöst. Während des mehrstündigen Enzystierungsprozesses werden die für die Zystenwandbildung benötigten Proteine und Glycopolymere im Trophozoiten produziert und über mehrere Transportschritte in die Zystenwand eingebaut. Die beiden Hauptproteine der Zystenwand (Cyst Wall Proteins) CWP-1 und CWP- 2 lagern sich zu einem großen Heterodimer, dem sogenannten Giardia Spezifischen Antigen, GSA-65, zusammen.
Werden also Zysten bei einer aktiven Infektion gebildet und im Kot ausgeschieden, kann der spezielle ELISA diese Antigene nachweisen.
Die Zysten können außerdem mikroskopisch mittels Direktnachweis-Verfahren angereichert und nachgewiesen werden. Zur Verfügung stehen im Labor ParaDocs das SAF-Verfahren (Fixierung, Anreicherung und mikroskopischer Nachweis von Giardia-Zysten und ein Immunfluoreszenz-Verfahren zum gleichzeitigen Nachweis von Giardia-Zysten und Cryptosporidia-Oozysten.
Da Giardia-Zysten nicht dauerhaft gebildet und ausgeschieden werden, ist für beide Verfahrenstypen die Untersuchung einer Sammelkotprobe von mehreren Tagen zu empfehlen.
Literatur:
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